一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介

1. 產(chǎn)品名稱(chēng)：小鼠真皮微血管內皮細胞

2. 組織來(lái)源：皮膚組織

3. 產(chǎn)品規格：5×105 cells/T25細胞培養瓶

4. 細胞簡(jiǎn)介：

小鼠真皮微血管內皮細胞分離自真皮組織；真皮，位于表皮深層，向下與皮

下組織相連，真皮結締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起，埋于基質(zhì)

內。其內分布著(zhù)各種結締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維，使皮膚既有彈

性，又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結構組成是膠原蛋

白、彈性纖維以及基質(zhì)。微血管內皮細胞（MEC）在炎癥反應、腫瘤生長(cháng)、創(chuàng )面

愈合過(guò)程中起著(zhù)非常重要的作用。在創(chuàng )面愈合研究領(lǐng)域，由于表皮細胞、真皮成

纖維細胞體外培養技術(shù)的成熟，人們對這兩種細胞早已進(jìn)行了大量深入的研究。

與之相比，對參與創(chuàng )面愈合過(guò)程的另一種主要細胞——真皮微血管內皮細胞，則

因其體外分離培養技術(shù)的困難而使相關(guān)的研究受限。

   本公司生產(chǎn)的小鼠真皮微血管內皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結

合密度梯度離心法、最后通過(guò)內皮細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái)，細胞總量

約為5×105 cells/瓶；細胞經(jīng)CD31/vWF免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含

有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

5. 培養基信息：

M199、FBS、內皮細胞生長(cháng)添加劑、Heparin、Ascorbic Acid、Hydrocortisone、

Penicillin、Streptomycin等

我們推薦使用小鼠真皮微血管內皮細胞專(zhuān)用完全培養基（產(chǎn)品貨號：CM-M201）作

為體外培養小鼠真皮微血管內皮細胞的培養基。

二、細胞培養狀態(tài)

發(fā)貨時(shí)發(fā)送細胞電子版照片

三、使用方法

在技術(shù)部標準操作流程下，小鼠真皮微血管內皮細胞可傳2-3代左右；建議您收到

細胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗。

客戶(hù)收到細胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽

和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態(tài)。

2. 待細胞達到80%匯合時(shí)準備進(jìn)行傳代培養。3. 細胞傳代

1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；

2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中，輕微轉動(dòng)培養瓶至消化液覆蓋整個(gè)培

養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀(guān)察，待

細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化；

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2-1:3適當的比例進(jìn)行接種傳代，然后補充新鮮的完全

培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；

4) 待細胞完全貼壁后，培養觀(guān)察；之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

四、注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細胞培養過(guò)程中，請注意保持無(wú)菌操作。

3. 傳代培養過(guò)程中，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(cháng)，否則會(huì )影響細胞貼壁及其生長(cháng)狀態(tài)。

4. 建議客戶(hù)收到細胞后前3天每個(gè)倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技

術(shù)部溝通；由于運輸的原因，個(gè)別敏感細胞會(huì )出現不穩定的情況，請及時(shí)和我們

聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪(fǎng)直至問(wèn)題得到

解決。

5. 該細胞只可用于科研。

備注：由于實(shí)驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實(shí)驗室參考