醫學(xué)上通常用裸鼠成瘤實(shí)驗來(lái)研究腫瘤及其治療：用帶有人源移植瘤的裸鼠來(lái)試可能的靶向藥物，可以在腫瘤復發(fā)之前都找到真正有效的靶向藥物。裸鼠成瘤實(shí)驗，即在裸鼠皮下注入腫瘤細胞，觀(guān)察腫瘤的形成、發(fā)展及抗腫瘤藥物的效果。
今天以Hep-G2細胞為例，介紹裸鼠皮下成瘤的實(shí)驗小技巧及問(wèn)題解答！
一、接種步驟
1、 接種是選好進(jìn)針部位，大部分選擇腋下接種，接種前用75%的酒精對進(jìn)針部位擦拭消毒。
2、 排去一次性針頭內空氣，從進(jìn)針部位向前穿刺大約1cm，進(jìn)行皮下注射。
3、 注射時(shí)，每次注射量大約為0.2ml，每日觀(guān)察。
4、 注射完畢后，緩慢退出針頭，盡量避免漏液；
5、 注射過(guò)程中，細胞需一直置于冰上，使細胞處于比較低的代謝狀態(tài)，并盡量在半小時(shí)內完成。
實(shí)驗結果：一般接種7-10天后便可看到腫塊長(cháng)起；
二、操作小技巧
1、細胞的狀態(tài)是成瘤實(shí)驗的關(guān)鍵，所以細胞生長(cháng)狀態(tài)一定要好，取處于對數生長(cháng)期的細胞，細胞達80-90%左右密度為宜。收集細胞前一天晚上更換新鮮培養基；
2、注射向前方穿行，注射前針頭稍微動(dòng)一動(dòng)，能動(dòng)說(shuō)明在皮下，否則可能在皮內或者肌肉內；
3、注射前，要排去針管內的空氣；
4、針頭在皮下走一段再注射，速度不可太快
5、接種點(diǎn)離進(jìn)針點(diǎn)盡量1cm遠，減少漏液和污染的可能；
三、常見(jiàn)問(wèn)題及解答
一、這個(gè)實(shí)驗為什么用裸鼠而不用普通的老鼠或者小白鼠？
裸鼠成瘤實(shí)驗用的裸鼠，最大的特點(diǎn)是沒(méi)有胸腺等免疫器官，它的免疫力幾乎為０，對腫瘤細胞沒(méi)有免疫作用，易于成瘤。
自然狀態(tài)下的老鼠和小白鼠有完整的免疫系統。免疫系統有免疫防御、免疫自穩、免疫監視三大生理功能，并通過(guò)免疫識別和免疫排斥攻擊兩大生理反應起作用。具有完整免疫系統的老鼠和小白鼠，會(huì )通過(guò)免疫識別反應來(lái)識別自己與非己，發(fā)現注入的腫瘤細胞這種非己抗原后，會(huì )啟動(dòng)免疫排斥攻擊反應進(jìn)行殺滅，這樣腫瘤就很難形成，實(shí)驗就難以進(jìn)行下去。
二、小鼠瘤子長(cháng)起來(lái)又消失？
腫瘤塊先縮小，后變大很常見(jiàn)，很可能是炎癥反應，腫瘤細胞被小鼠自身吸收，繼續觀(guān)察腫瘤細胞吸收之后是否經(jīng)過(guò)幾周還能長(cháng)出來(lái)，長(cháng)不起來(lái)建議換鼠。
三、如何抓牢裸鼠?
可以用左手拇指和食指捏緊裸鼠頸背部皮膚，小拇指夾住裸鼠尾巴，然后進(jìn)行接種。
四、是否可以在一只小鼠進(jìn)行多個(gè)點(diǎn)荷瘤？
不可以，一只老鼠就只能接種一個(gè)點(diǎn)。因為一個(gè)老鼠身上有多個(gè)腫瘤塊的情況下，可能會(huì )相互影響。
五、腫瘤長(cháng)不出來(lái)是怎么回事？
第一：腫瘤生長(cháng)周期很慢，一周開(kāi)始生長(cháng)腫塊，大約需要1~2個(gè)月才能長(cháng)成腫瘤。
第二：可能是細胞狀態(tài)差，活力不好，或是腫瘤細胞不易成瘤，需加入Matrigel輔助或增大接種量或更換細胞系；
第三：一方面可能是小鼠周齡太大，或小鼠免疫排斥，建議更換免疫缺陷程度更大的小鼠（Nod-scid小鼠，NOG小鼠＞Nude裸鼠）
六、腫瘤體積相差很大，大小不一？
首先，不是所有的腫瘤都能夠長(cháng)得均一形態(tài)規則。
其次，荷瘤分組發(fā)現小鼠腫瘤體積差距很大，這可能跟小鼠周齡及接種細胞量不一致導致，建議重新做實(shí)驗分組。
最后，一般構建腫瘤模型，裸鼠主要保證周齡，周齡小一點(diǎn)好。
總之，裸鼠成瘤概括來(lái)說(shuō)就是，大膽的接種，勤觀(guān)察，勤記錄，一定要仔細記錄！
