產(chǎn)品名稱(chēng) |
人原代食管平滑肌細胞 |
商品貨號 |
MZ-3552 |
組織來(lái)源 |
正常人食管組織 |
規格 |
5×105cells/T25培養瓶 |
生長(cháng)特性 |
貼壁 |
細胞形態(tài) |
成纖維細胞樣 |
培養基 |
DMEM高糖培養基,含FBS、平滑肌細胞生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等(建議購買(mǎi)原代食管平滑肌細胞專(zhuān)用培養基) |
細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
細胞描述 |
食管是咽和胃之間的消化管,哺乳動(dòng)物的食管結構上由內向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層、外膜。食管平滑肌集中在肌層,僅在食管的下 2/3段存在,其中中段的 1/3位骨骼肌和平滑肌混合組成,下 1/3段全部為平滑肌,而上段?? 1/3 全部為骨骼肌。 食管的運動(dòng),上部的橫紋肌受舌咽神經(jīng)和迷走神經(jīng)的支配,這些運動(dòng)神經(jīng)元末梢以運動(dòng)終板形式進(jìn)入骨骼肌。迷走神經(jīng)尚支配食管其余部分的平滑肌,其節前纖維末梢與食管壁內神經(jīng)叢的節細胞發(fā)生突觸聯(lián)系,再發(fā)出節后纖維支配平滑肌細胞。在吞咽時(shí),吞咽中樞興奮通過(guò)上述運動(dòng)神經(jīng)元和迷走神經(jīng)傳出纖維,引起食管各段的肌肉發(fā)生蠕動(dòng)。食管壁內神經(jīng)叢可以不依賴(lài)外來(lái)神經(jīng)來(lái)控制食管蠕動(dòng)。細胞鑒定:平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽(yáng)性。 |
細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 |
細胞復蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過(guò)夜)。第二天換液并檢查細胞密度。 |
細胞凍存步驟 |
待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
主要功能 |
(1) 主要功能是負責食管的收縮蠕動(dòng),推動(dòng)食物向下運動(dòng)。 (2) 平滑肌的收縮可能是通過(guò)增加細胞內Ca2+濃度或激活G 蛋白,激活磷脂酶, 并激活PKC-epsilon 依賴(lài)的信號通路。 (3) 食管平滑肌細胞可以表達Na(+)通道。 |
主要病生理變化 |
(1) 食管癌。 (2) 食管炎。 |