產(chǎn)品名稱(chēng) |
人食管上皮細胞 |
商品貨號 |
MZ-3551 |
組織來(lái)源 |
正常人食管組織 |
規格 |
5×105cells/T25培養瓶 |
生長(cháng)特性 |
貼壁 |
細胞形態(tài) |
上皮細胞樣 |
培養基 |
M199培養基,含FBS、上皮細胞生長(cháng)添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等 建議購買(mǎi)原代食管上皮細胞專(zhuān)用培養基 |
細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
細胞描述 |
食管是咽和胃之間的消化管,哺乳動(dòng)物的食管結構上由內向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層、外膜。其中上皮細胞主要在黏膜層,其上皮為較厚的未角化的復層扁平上皮,耐摩擦,有保護作用。在發(fā)育過(guò)程中,食管的上皮細胞增殖,由單層變?yōu)閺蛯?,使管腔變狹窄,甚至一度閉鎖,以后管腔又重新出現。在食管與胃賁門(mén)交界處,復層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。 食管損傷、從而導致食管長(cháng)期的慢性炎癥、潰瘍,或慢性刺激,進(jìn)而食管上皮增生,最后導致癌變。實(shí)驗證明,彌漫性或局灶性上皮增生可能是食管癌的癌前期病變。在食管癌的發(fā)生中,上皮-間質(zhì)轉化( EMT)是上皮細胞來(lái)源的惡性腫瘤細胞獲得遷移和侵襲能力的重要生物學(xué)過(guò)程,有利于腫瘤轉移。細胞鑒定:廣譜角蛋白(PCK)免疫熒光染色為陽(yáng)性。 |
細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 |
細胞復蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過(guò)夜)。第二天換液并檢查細胞密度。 |
細胞凍存步驟 |
待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
主要功能 |
(1) 食管上皮細胞頂端細胞膜和細胞間連接復合體聯(lián)合在一起產(chǎn)生有效滲透屏障, 防止食管內容物滲入。 (2) 食管上皮細胞使表層細胞的基質(zhì)外側細胞膜和深層細胞的全部細胞膜均不暴露 于食管腔內規律的大幅波動(dòng)的滲透壓之下。 (3) 食管上皮基底層的細胞可增殖并向食管腔移行。 |
主要病生理變化 |
(1) 反流性食管炎。 (2) 食管狹窄。 (3) 食管癌。 |