一、菌種簡(jiǎn)介
1、菌種名稱(chēng):酵米面假單胞菌(酵米面黃桿菌) Pseudomonas Cocovenenans Subsp
2、菌株編號:B82451
3、原始編號:ZSU←SDV 1.50
4、具體用途:分類(lèi);研究;教學(xué)
二、儲存條件
• 斜面菌種和凍干菌種應在2~8℃保存。
三、培養條件
1、培養基編號: Potato Dextrose Agar PDA (馬鈴薯、葡萄糖瓊脂)
2、培養溫度:37℃
附: -80℃和液氮保藏方法:
(1)培養:將菌種接種于合適培養基,培養基用固體或液體均可,對生長(cháng)較快(如大部分弧菌、希瓦氏菌)和生長(cháng)較慢的菌株用液體培養基培養比較好。培養時(shí)期掌握在對數生長(cháng)期或對數生長(cháng)后期。
(2)收集菌體:液體培養時(shí),離心棄去上清液;以平板或斜面培養時(shí),刮取菌體。
(3)保護劑:20%甘油(或20%甘油+5%海藻糖保藏效果更好)滅菌。
(4)分裝:將菌體與保護劑混勻,菌體用量不能太少,混勻后看上去要渾濁;分裝到若干凍存管。
(5)降溫:及時(shí)放冰箱,先放-20℃,1-2小時(shí)后轉移至-70℃至-80℃。如放入液氨中保藏,須注意樣品溫度降至-40℃以下再放。
(6)活化: 從冰箱或液氮中取出甘油管后,立即放置在40C溫水中搖晃使冰融化,約需50秒-100秒;吸取適量?jì)热菸镏吝m宜培養基培養。
*也可從冰箱或液氮中取出后,用低溫冰盒保溫,牙簽刮取少許冰接種至合適培養基,甘油管可再放回原處低溫保藏(注意動(dòng)作要快避免過(guò)度升溫)。
四、注意事項
•凍干首次活化, 干粉要全部用完,不能保留,用0.2-0.5m1的培養液或者無(wú)菌水溶解,接種在2支斜面上,因凍干菌種處于休眠狀態(tài),請勿接種多支斜面或平板,以免因接種不足而導致復蘇不成功;
•復蘇后,微生物菌種應保藏于建議的溫度、清潔和千燥的地方,室溫放置時(shí)間過(guò)長(cháng)會(huì )導致菌種衰退;
•菌種操作應在無(wú)菌條件下進(jìn)行;轉種完畢,應經(jīng)滅菌再做丟棄處理,以免污染周?chē)h(huán)境。
•凍干菌復蘇后,應根據菌種狀況及時(shí)轉接傳代;
•操作前,如果有不明白之處,應先咨詢(xún)我中心技術(shù)人員,避免不必要的損失。