一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介
2. 組織來(lái)源:臍帶組織
3. 產(chǎn)品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶
4. 細胞簡(jiǎn)介:
人臍靜脈平滑肌細胞分離自臍帶組織;它是臍靜脈的重要結構組成細胞之一,在機體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著(zhù)重要作用。臍帶是哺乳類(lèi)的連接胎兒和胎盤(pán)的管狀結構,臍帶中通過(guò)尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中,子宮動(dòng)脈在胎盤(pán)的母體部分出的毛細血管,與胎盤(pán)的子體部胎兒毛細血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營(yíng)養物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運送至胎盤(pán),臍靜脈將O2和營(yíng)養物質(zhì)從胎盤(pán)運送給胎兒。血管平滑肌是許多重大血管疾病的細胞基礎;
血管平滑肌細胞的異常增加的生長(cháng)潛力在血管疾病發(fā)生過(guò)程中起決定作用。由于臍帶是分娩過(guò)程中的廢棄物,同時(shí)從臍帶中分離
人臍靜脈平滑肌細胞方法相對成熟,使得體外培養的臍靜脈平滑肌細胞作為研究血管的模型細胞。臍靜脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見(jiàn)細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長(cháng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長(cháng),高低起伏;細胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長(cháng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(cháng)特點(diǎn)。
明舟生物(mingzhoubio)生產(chǎn)的臍靜脈平滑肌
細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來(lái),
細胞總量約為5×105cells/瓶;
細胞經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5. 培養基信息:
DMEM[H]、FBS、平滑肌細胞生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
發(fā)貨時(shí)發(fā)送
細胞電子版照片
三、使用方法
在明舟生物(mingzhoubio)技術(shù)部標準操作流程下,
人臍靜脈平滑肌細胞可傳3-5代左右,隨著(zhù)傳代次數的增加,細胞會(huì )呈現老化狀態(tài),生長(cháng)速度減緩,3代以?xún)燃毎麪顟B(tài)最佳;建議您收到
細胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗。
客戶(hù)收到
細胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態(tài)。
2. 待
細胞達到80%匯合時(shí)準備進(jìn)行傳代培養。
1) 吸出T25
細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中,輕微轉動(dòng)培養瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀(guān)察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2-1:3適當的比例進(jìn)行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
4) 待
細胞完全貼壁后,培養觀(guān)察;之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。
四、注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在
細胞培養過(guò)程中,請注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養過(guò)程中,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(cháng),否則會(huì )影響細胞貼壁及其生長(cháng)狀態(tài)。
4. 建議客戶(hù)收到細胞后前3天每個(gè)倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通;由于運輸的原因,個(gè)別敏感細胞會(huì )出現不穩定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪(fǎng)直至問(wèn)題得到解決。
備注:由于實(shí)驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實(shí)驗室參考