細胞英文名稱(chēng):CAM191
形態(tài)特性：淋巴母細胞樣
生長(cháng)特性：懸浮
培養體系：1640+10%FBS
凍存條件：細胞庫無(wú)血清凍存液
二、細胞收到后處理細胞在培養瓶中培養至良好狀態(tài)后灌滿(mǎn)完全培養液并封好瓶口是細胞運輸的最好辦法。收到細胞回到自己的實(shí)驗室后，先打開(kāi)外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無(wú)菌操作。鏡下觀(guān)察：未超過(guò)80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養液移入廢液缸中，懸浮細胞需離心處理，加入6ml新鮮完全培養基，放入37℃、5%CO2孵箱培養；超過(guò)80%匯合度時(shí)，根據情況傳代或者凍存，具體操作見(jiàn)細胞培養步驟。
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜（或將細胞懸液加入6cm皿中，加入約6ml培養基，培養過(guò)夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）EBV-轉化人淋巴細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
1、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細胞凍存。貼壁細胞凍存時(shí)，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，進(jìn)行離心收集，1000RPM條件下離心8-10分鐘，去除上清，按凍存數量加入細胞庫推薦的無(wú)血清凍存液。
PS：若客戶(hù)收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺或安全柜內，嚴格無(wú)菌操作；將小管細胞轉移至T25培養瓶或6cm培養皿，加入5ml左右完全培養基混勻，放入培養箱過(guò)夜培養后查看細胞密度：若密度未超過(guò)80%，換液繼續培養，視情況傳代或者凍存。若密度超過(guò)80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
