四、液體和半固體接種法
1)液體接種法
包括從外面菌種接入培養液,或從液體菌種接入液體培養液,兩種情況都可以用接種環(huán)接種。但在培養量比較大的情況下,液體接種宜采用移液管接種,要求無(wú)菌操作。
左手持試管,右手將燒灼過(guò)的接種環(huán)伸入菌種管,待冷卻后,取菌液一環(huán),立即移入培養基管中,在接近液面的管壁上輕輕研磨,然后將試管稍?xún)A斜,并沾取少許液體調和,使菌液混合于培養基中(圖5,A)
2)半固體培養基接種法
將燒灼過(guò)的接種針插入菌種管冷卻后,沾取菌液少許,立即垂直插入半固體培養基的中心至接近于管底處,但不可直刺至管底,然后循原路退出(圖5,B)。管口通過(guò)火焰,塞上棉塞,接種針燒灼滅菌后放下。
將上述已接種好的培養物,37℃度恒溫箱內培養,24小時(shí)后取出觀(guān)察結果。
圖5
五、涂布接種法
用無(wú)菌移液管吸取菌懸液0.1mL,滴加于培養基平板上,右手持無(wú)菌涂布棒,左手拿培養皿,并用拇指將皿蓋打開(kāi)一縫,在火焰旁右手持涂布棒與培養皿平板表面將菌液自平板中央均勻向四周涂布擴散,切忌用力過(guò)猛將菌液直接推向平板邊緣或將培養基劃破。接種后,將平板倒置于恒溫箱中,培養觀(guān)察。