一、 兔骨髓間充質(zhì)干細胞 產(chǎn)品簡(jiǎn)介 

1. 產(chǎn)品名稱(chēng)：兔骨髓間充質(zhì)干細胞 

2. 組織來(lái)源：骨髓 

3. 產(chǎn)品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 

4. 細胞簡(jiǎn)介： 

兔骨髓間充質(zhì)干細胞（BMSC）分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內。成年動(dòng)物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(cháng)骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱(chēng)為紅骨髓。出生時(shí)，紅骨髓充滿(mǎn)全身骨髓腔，隨著(zhù)年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質(zhì)系統內存在的骨髓間充質(zhì)干細胞是一種除造血干細胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞，可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化，因此可以作為組織工程中的種子細胞。在骨髓中，BMSC占骨髓有核細胞總數的0.001%-0.1%，含量極低。骨髓間充質(zhì)干細胞的體外培養條件要求較高，在培養過(guò)程中，受貼壁時(shí)間、種植密度、血清含量、培養溫度和培養基pH值等條件的影響。 

本公司生產(chǎn)的兔骨髓間充質(zhì)干細胞采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合培養基篩選制備而來(lái)，細胞總量約為5×105cells/瓶；細胞經(jīng)CD90/CD44、CD34/CD45免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 

5. 培養基信息： 

DMEM-F12、FBS、間充質(zhì)干細胞生長(cháng)添加劑、Glutamine、Penicillin、Streptomycin等 

我們推薦使用兔骨髓間充質(zhì)干細胞專(zhuān)用完全培養基作為體外培養兔骨髓間充質(zhì)干細胞的培養基。 

二、使用方法 

在技術(shù)部標準操作流程下，兔骨髓間充質(zhì)干細胞可傳3-5代左右，隨著(zhù)傳代次數的增加，細胞會(huì )呈現老化狀態(tài)，生長(cháng)速度減緩，3代以?xún)?/span>細胞狀態(tài)最佳；建議您收到細胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗。 

客戶(hù)收到細胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作。 

1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態(tài)。 

2. 待細胞達到80%匯合時(shí)準備進(jìn)行傳代培養。 

 3. 細胞傳代 

1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次； 

2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中，輕微轉動(dòng)培養瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀(guān)察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化； 

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2-1:3適當的比例進(jìn)行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養； 

4) 待細胞完全貼壁后，培養觀(guān)察；之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。 

三、注意事項 

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。 

2. 在細胞培養過(guò)程中，請注意保持無(wú)菌操作。 

3. 傳代培養過(guò)程中，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(cháng)，否則會(huì )影響細胞貼壁及其生長(cháng)狀態(tài)。 

4. 建議客戶(hù)收到細胞后前3天每個(gè)倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運輸的原因，個(gè)別敏感細胞會(huì )出現不穩定的情況，請及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪(fǎng)直至問(wèn)題得到解決。 

5. 該細胞只可用于科研。  

備注：由于實(shí)驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實(shí)驗室參考